培養(yǎng)基是適于細菌生長繁殖需要的各種營養(yǎng)物質人工配制而成的基質。按營養(yǎng)成分和用途不同,分為基礎、合成、營養(yǎng)、鑒別、選擇和厭氧培養(yǎng)基。按物理形態(tài)分為固體、半固體和液體三類。根據(jù)細菌的種類和培養(yǎng)目的不同,可采用不同的培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基常用的滅菌方法主要是濕熱滅菌和過濾除菌。
1、濕熱滅菌:
蒸汽在冷凝時釋放出大量潛能,并且蒸汽具有強大穿透力,蒸汽的濕熱破壞菌體蛋白質和核酸的化學鍵,使酶失活,微生物因代謝障礙而死亡。濕熱滅菌的效果,取決于致死溫度和致死時間。致死溫度是殺滅微生物的極限溫度。致死時間是在致死溫度下殺滅全部微生物所需時間。
高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養(yǎng)基、接種器械和蒸餾水的滅菌。分裝后應立即滅菌,應在當天內完成滅菌工作,不可過夜。消毒時間不宜過長,也不能超過規(guī)定的壓力范圍,否則有機物質就會在高溫下分解,失去營養(yǎng)作用,也會使培養(yǎng)基變質、變色,甚至難以凝固。
2、過濾除菌:
一些抗生素及有機物等,遇熱容易分解,不能與培養(yǎng)基一起進行高溫滅菌,而要使用細菌過濾器濾去其中的雜菌,例如含抗生素的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。過濾后的溶液要立即加入培養(yǎng)基中,若為液體培養(yǎng)基,可在冷卻至30℃時加入;若為固體培養(yǎng)基,必須在凝固之前(50-60℃)加入,振蕩使溶液與其他成分混合均勻。