豬瘟藍耳口蹄疫CSFV/PRRSV-M/FMDV-U熒光PCR說明書
【產品名稱】
商品名稱:豬瘟病毒/高致病性豬藍耳病毒/口蹄疫病毒通用型(CSFV/PRRSV-M/FMDV-U)核酸檢測試劑盒 (熒光-PCR法)
Name :Classical swine fever virus / highly pathogenic porcine ear virus / foot-and-mouth disease virus (CSFV/PRRSV-M/FMDV-U) nucleic acid detection kit (fluorescent -PCR method)
【包裝規格】48T/盒
【預期用途】
口蹄疫病毒(FMDV)屬小 RNA 病毒科屬,是小的動物病毒之一,在世界范圍廣泛分布,其中,O、A、C 型 FMDV 的毒力和抗原性均易發生變易,幾乎遍布亞、非、拉、歐各洲;AsiaⅠ型主要分布在亞洲;SATI、SAT2、SAT3 型主要分布在非洲[1-2]??谔阋卟《狙逍蛷碗s多變,為檢測帶來了較大的難度[3]。
本試劑盒適用于檢測口蹄疫易感動物的水泡皮及水泡液、O/P 液等標本中CSFV/PRRSV-M/FMDV-U RNA,適用于CSFV/PRRSV-M/FMDV-U感染的輔助診斷。
【檢驗原理】
本試劑盒對CSFV/PRRSV-M/FMDV-U特異核酸序列設計引物和探針,用一步法熒光RT-PCR 技術對CSFV/PRRSV-M/FMDV-U RNA 進行體外擴增檢測,用于臨床上對可疑感染者的病原學診斷。
【試劑組成】
名 稱 規 格
酶液 50μL×1 管
FMDV-U 反應液 1.0mL×1 管
FMDV-U 陽性質控品 50μL ×1 管
陰性質控品 250μL ×1 管
注:
1)不同批號試劑不能混用。
2)試劑盒內各試劑組份足夠包裝規格所標示的檢測次數。
【儲存條件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融次數不超過 5 次,有效期 12 個月。
【適用儀器】
ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。
【標本采集】
病死或撲殺動物,取水泡皮及水泡液;待檢活動物,取 O/P 液 2~3mL。
【保存和運輸】
上述標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過 6 個月,標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸,嚴禁反復凍融。
【使用方法】
1.樣品處理(樣本處理區)
1.1樣本前處理
水泡皮樣品:稱取水泡皮 0.5g 于研磨器中研磨,加入生理鹽水繼續研磨,待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中,8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中;OP 液或水泡液樣品,直接取 100μL 置于 1.5mL 滅菌離心管中。
1.2RNA 提取
推薦采用上海晅科生物科技有限公司生產的RNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請按照試劑盒說明書進行操作。
2.試劑配制(試劑準備區)
根據待檢測樣本總數,設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽性對照;樣品每滿 7 份,多配制 1 份),每測試反應體系配制如下表:
3.加樣(樣本處理區)
將步驟 1 提取的 RNA、陽性質控品、陰性質控品各取 4μL,分別加入相應的反應管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。
6.質控標準
陰性質控品:無明顯擴增曲線且無 Ct 值顯示;
陽性質控品:擴增曲線有明顯指數生長期,且 Ct 值≤32; 以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。
公司優勢:
1)質量:我司提供的的試劑為世界
2)價格:價格實惠,量大從優。
4)服務:提供完整的售前、售后和售中服務。售后到底
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